ΜΕΛΕΤΕΣ ΣΥΜΠΛΟΚΩΝ ΜΙΚΡΟΜΟΡΙΩΝ ΜΕ ΜΑΚΡΟΜΟΡΙΑ (ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ, ΚΥΚΛΟΔΕΞΤΡΙΝΕΣ) ΜΕ ΤΗΝ ΤΕΧΝΙΚΗ ΕΙΣΑΓΩΓΗΣ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ ΣΕ ΡΟΗ

Abstract

ΠΕΡΙΓΡΑΦΕΤΑΙ Η ΑΝΑΠΤΥΞΗ ΔΙΑΦΟΡΩΝ ΑΥΤΟΜΑΤΟΠΟΙΗΜΕΝΩΝ ΦΑΣΜΑΤΟΦΩΤΟΜΕΤΡΙΚΩΝ ΚΑΙ ΠΟΤΕΝΣΙΟΜΕΤΡΙΚΩΝ ΜΕΘΟΔΩΝ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΥ ΣΤΑΘΕΡΩΝ ΣΧΗΜΑΤΙΣΜΟΥ ΣΥΜΠΛΟΚΩΝ ΜΙΚΡΟΜΟΡΙΩΝ ΜΕ ΜΑΚΡΟΜΟΡΙΑ, ΜΕ ΤΗΝ ΤΕΧΝΙΚΗ ΕΙΣΑΓΩΓΗΣ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ ΣΕ ΡΟΗ ΒΑΘΜΙΔΩΣΗΣ ΣΥΓΚΕΝΤΡΩΣΗΣ. ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΑΝ ΟΙ ΙΣΟΡΡΟΠΙΕΣ ΤΩΝ ΔΕΙΚΤΩΝ ΦΑΙΝΟΛΟΦΘΑΛΕΙΝΗ ΚΑΙ Π-ΝΙΤΡΟΦΑΙΝΟΛΗ ΜΕ ΤΗ Β-ΚΥΚΛΟΔΕΞΤΡΙΝΗ ΚΑΙ ΠΟΡΤΟΚΑΛΟΧΡΟΥΝ ΤΟΥ ΜΕΘΥΛΙΟΥ ΜΕ ΤΗΝ Α-ΚΥΚΛΟΔΕΞΤΡΙΝΗ. ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΤΗΚΑΝ ΜΕ ΦΑΣΜΑΤΟΦΩΤΟΜΕΤΡΙΑ ΟΡΑΤΟΥ, ΟΙ ΑΝΤΙΣΤΟΙΧΕΣ ΣΤΑΘΕΡΕΣ ΣΧΗΜΑΤΙΣΜΟΥ. ΕΠΕΞΕΡΓΑΣΙΑ ΤΩΝ ΔΕΔΟΜΕΝΩΝ ΕΓΙΝΕ ΜΕ ΓΡΑΜΜΙΚΗ ΚΑΙ ΜΗ ΓΡΑΜΜΙΚΗ ΠΡΟΣΑΡΜΟΓΗ ΣΤΟΘΕΡΜΟΔΥΝΑΜΙΚΟ ΜΟΝΤΕΛΟ. ΜΕ ΧΡΗΣΗ ΤΟΥ ΙΔΙΟΥ ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ ΕΚΤΕΛΕΣΤΗΚΑΝ ΠΕΙΡΑΜΑΤΑ ΕΜΜΕΣΗΣ ΣΥΜΠΛΟΚΟΠΟΙΗΣΗΣ (ΣΥΝΑΓΩΝΙΣΤΙΚΗΣ) ΜΕ ΦΑΣΜΑΤΟΦΩΤΟΜΕΤΡΙΚΟΥΣ ΙΧΝΗΘΕΤΕΣ ΤΗ ΦΑΙΝΟΛΟΦΘΑΛΕΙΝΗ ΚΑΙ ΤΟ ΠΟΡΤΟΚΑΛΟΧΡΟΥΝ ΤΟΥ ΜΕΘΥΛΙΟΥ. ΜΕ ΤΗΝ ΤΕΧΝΙΚΗ ΑΥΤΗ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΤΗΚΑΝ ΟΙ ΣΤΑΘΕΡΕΣ ΣΥΜΠΛΟΚΟΠΟΙΗΣΗΣ ΔΙΑΦΟΡΩΝ ΦΑΡΜΑΚΩΝ, ΚΑΙ ΙΟΝΤΩΝ ΣΥΣΤΑΤΙΚΩΝ ΡΥΘΜΙΣΤΙΚΩΝ ΔΙΑΛΥΜΑΤΩΝ. ΣΤΗ ΣΥΝΕΧΕΙΑ, ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΘΗΚΕ ΗΛΕΚΤΡΟΔΙΟ ΕΚΛΕΚΤΙΚΟ ΣΤΑ ΑΝΙΟΝΤΑ ANS (1-ΑΝΙΛΙΝΟ-8-ΝΑΦΘΑΛΙΝΟΣΟΥΛΦΟΝΙΚΩΝ) ΣΕ ΡΟΗ, ΓΙΑ ΤΟΝ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟ ΤΩΝ ΣΤΑΘΕΡΩΝ ΣΧΗΜΑΤΙΣΜΟΥ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΟΚΟΥ ANS ΚΑΙ ΑΒΟΥΜΙΝΗΣ, ΚΑΘΩΣ ΚΑΙ ΤΟΥ ΑΡΙΘΜΟΥ ΤΩΝ ΘΕΣΕΩΝ ΣΥΝΔΕΣΗΣ. ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΘΗΚΕ ΤΟ ΜΟΝΤΕΛΟ SCATCHARD ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ. ΕΚΤΕΛΕΣΤΗΚΑΝ ΠΕΙΡΑΜΑΤΑ ΣΥΝΑΓΩΝΙΣΤΙΚΗΣ ΣΥΜΠΛΟΚΟΠΟΙΗΣΗΣ ΜΕ ΙΧΝΗΘΕΤΗ ANS ΓΙΑ ΤΟΝ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟ ΤΩΝ ΠΑΡΑΜΕΤΡΩΝ ΣΥΝΔΕΣΗΣ ΔΙΑΦΟΡΩΝ ΦΑΡΜΑΚΩΝ ΜΕ ΤΗΝ ΑΛΒΟΥΜΙΝΗ.

THE DEVELOPMENT OF AUTOMATED GRADIENT FLOW INJECTION (FI) SPECTROPHOTOMETRIC AND POTENTIOMETRIC TECHNIQUES FOR THE DETERMINATION OF FORMATION CONSTANTS OF COMPLEXES OF MACROMOLECULES AND MICROMOLECULES IS DESCRIBED. THE COMPLEXATION OF DYES, SUCH AS PHENOLPHTHALEIN AND P-NITROPHENOL WITH B-CYCLODEXTRIN (CD) AND METHYL ORANGE WITH A-CD WAS STUDIED. IN DIRECT COMPLEXATION STUDIES, THE FORMATION CONSTANT OF A COMPLEX WAS DETERMINED BASED ON THE SPECTRAL CHANGES UPON COMPLEXATION OF THE DYE WITH THE CD. LINEAR AND NON LINEAR FITTINGS OF ABSORBANCE DATA TO THE THERMODYNAMIC MODEL OF COMPLEXATION WERE USED. FOR THE FIRST TIME A SIMPLE AND VALID EMPIRICAL APPROACH IS PROPOSED AND USED FOR THE CALIBRATION OF THE DISPERSION PROFILE OF THE F1 SYSTEM. THE DYES PHENOLOPHTHALEIN AND METHYL ORANGE WERE USED AS PROBES IN COMPLEXATION STUDIES BY ADAPTING THE COMPETITIVE INDICATOR APPROACH TO THE F1 GRADIENT TECHNIQUE. THUS THE COMPLEXATIONCONSTANTS OF VARIOUS DRUGS WITH A-AND B- CD WERE DETERMINED. IN THE PROGRESS OF THE WORK, FOR THE FIRST TIME THE ELECTRODE SELECTIVE TO THE ANIONS OF 1-ANILINO-8-NAPHTHALENE SULPHONATE (ANS) WAS USED IN A FLOW SYSTEM, FOR THE DETERMINATION OF BINDING PARAMETERS OF THE ANS-ALBUMIN COMPLEX. POTENTIAL DATA WERE FITTED TO THE SCATCHARD MODEL. ANS WAS ALSO USE AS A POTENTIOMETRIC PROBE FOR THE COMPETITIVE BINDING STUDY OF VARIOUS DRUGS SUCH AS SULPHAMETHOXAZOLE, SALICYLATE, AZAPROPAZONE, KETOPROFEN AND TOLMENTIN WITH ALBOUMIN.