Γονιδιακή έκφραση των μυοκαρδιακών κυττάρων μετά από φόρτιση πίεσης της αριστερής κοιλίας

Abstract

Increased ACE activity and mRNA expression are observed in rat hearts with pressure or volume-overload induced left ventricular hypertrophy (LVH). ACE-inhibitors induce the regression and prevent the development of LVH. Tumor supressive gene p53 up- regulates the cellular renin-angiotensin system, resulting in ANG II synthesis, which activates p53 creating a positive feed back loop. Methods and results: Γ14 rabbits were separated into 4 groups.Animals in Group A (n=6) served as the controls, while in Group B (n=36) underwent a sham operation. In Group C and D (n=36 each) a 60% stenosis of the ascending aorta was performed. In Group D animals were treated with enalapril. Animals in Groups B, C and D were divided in 6 subgroups according to the time of the terminal study (15, 45, 90, 180 min, 7 and 28 days post-surgery). LVH was estimated from the weight of the free wall of the left ventricle of the animals. For determination of p53, LV specimens were examined with Western blot analysis. Furthermore, in groups A, B, C, an immunohistochemical study was performed for the estimation of p53 expression. LVH was higher (p<0.05) in animals of Group C at 7 and 28 days compared to other Groups and the values between the two time points were no significant. p53 expression levels were elevated (p<0.05) in all Groups compared to Group A and were consistently higher at all time points in Groups B and C with the exception of Group D where they were decreased (p<0.05) at 180 min, 7 and 28 days. p53 immunoreactivity was present at all experimental phases except for Group A. Conclusions: LVH was induced to a significant degree at 7 and 28 days after aortic stenosis with no difference between the two periods while enalapril prevented hypertrophy. p53 was transcriptionally activated and immunoreactively present after acute pressure overload and in sham-operated groups in animal model. Enalapril decreased p53 expression at 180 min, 7 and 28 days aortic stenosis, but the precise mechanism of action remains to be explored.

Αυξημένη δραστηριότητα του μετατρεπτικού ένζυμου της αγγειοτασίνης (ΜΕΑ) και της έκφρασης του mRNA παρατηρούνται στο μυοκάρδιο μετά από πειραματική πρόκληση υπερτροφίας της αριστερής κοιλίας (YAK) συνέπεια αιμοδυναμικής υπερφόρτισης πίεσης ή όγκου. Οι αναστολείς του ΜΕΑ υποστρέφουν την YAK και παρεμποδίζουν την ανάπτυξη αυτής. Το ογκοκατασταλτικό γονίδιο ρ53 ρυθμίζει ανοδικά το κυτταρικό σύστημα ρενίνης-αγγειοτασίνης, με αποτέλεσμα τη σύνθεση της αγγειοτασίνης II, που ενεργοποιεί το ρ53, δημιουργώντας ένα θετικό ανατροφοδοτικό κύκλωμα.Μέθοδοι και αποτελέσματα: 114 κόνικλοι χωρίστηκαν σε 4 ομάδες. Την ομάδα A (n=6) αποτέλεσαν φυσιολογικά ζώα, ενώ η ομάδα Β (η=36) χαρακτηρίστηκε ομάδα ελέγχου. Στις ομάδες Γ και Δ (η=36 σε καθεμιά) πραγματοποιήθηκε 60% στένωση της ανιούσας αορτής. Στην ομάδα Δ χορηγήθηκε στα ζώα εναλαπρίλη. Τα ζώα των ομάδων Β, Γ και Δ χωρίστηκαν σε 6 υποομάδες σύμφωνα με το χρόνο της τελικής μελέτης (15, 45, 90, 180 λεπτά, 7 και 28 ημέρες μετεγχειρητικά). Η YAK υπολογίστηκε από το βάρος του ελεύθερου τοιχώματος της αριστερής κοιλίας των ζώων. Για τον προσδιορισμό του ρ53, τα δείγματα της αριστερής κοιλίας εξετάστηκαν με Western blot ανάλυση. Επιπλέον, στις ομάδες A, Β και Γ, πραγματοποιήθηκε ανοσοϊστοχημι- κή μελέτη για την εκτίμηση της έκφρασης του ρ53.Η YAK ήταν μεγαλύτερη (ρ<0.05) στα ζώα της ομάδας Γ στις 7 και 28 ημέρες συγκρινόμενη με αυτή των άλλων ομάδων και οι τιμές μεταξύ των δύο χρονικών φάσεων δεν ήταν στατιστικά σημαντικές. Τα επίπεδα έκφρασης του ρ53 ήταν αυξημένα (ρ<0.05) σε όλες τις ομάδες συγκρινόμενα με της ομάδας A και ήταν σταθερά υψηλότερα σε όλες τις χρονικές στιγμές στις ομάδες Β και Γ, με εξαίρεση την ομάδα Δ όπου ήταν μειωμένα (ρ<0.05) στα 180 λεπτά, 7 και 28 ημέρες. Η ανοσοδραστικότητα του ρ53 ήταν παρούσα σε όλες τις πειραματικές φάσεις εκτός από την ομάδα Α.Συμπεράσματα: Στις 7 και 28 ημέρες μετά από αορτική στένωση προ- κλήθηκε YAK σε σημαντικό βαθμό χωρίς καμιά διαφορά μεταξύ των δύο χρονικών περιόδων, ενώ η εναλαπρίλη εμπόδισε την υπερτροφία. Το ρ53 ήταν μεταγραφικά ενεργοποιημένο και ανοσοδραστικά παρόν τόσο στις ομάδες οξείας υπερφόρτισης πίεσης όσο και στην ομάδα ελέγχου των ζώων. Η εναλαπρίλη μείωσε την έκφραση του ρ53 στα 180 λεπτά, 7 και 28 ημέρες μετά από αορτική στένωση αλλά ο ακριβής μηχανισμός δράσης παραμένει υπό διερεύνηση.