ΕΣΤΕΡΑΣΕΣ ΤΟΥ ΨΑΡΙΟΥ TRACHURUS TRACHURUS. ΚΑΤΑΝΟΜΗ, ΚΑΘΑΡΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΦΥΣΙΚΟΧΗΜΙΚΟΣ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΠΟΛΛΑΠΛΩΝ ΜΟΡΙΑΚΩΝ ΜΟΡΦΩΝ

Abstract

THE MULTIPLE MOLECULAR FORMS OF ESTERASES IN THE 3 SPECIES OF THE GENUS TRACHURUS (T.TRACHURUS, T.PICTURATUS AND T. MEDITERRANEUS) WERE INVESTIGATED. THE ELECTROPHORETIC PROFILES OF WHITE MUSCLE EXTRACTS OF THE 3 SPECIES SHOWED A SPECIES- SPECIFICITY. TISSUE-SPECIFICITY WAS ALSO OBSERVED IN THE PROFILES OF EXTRACTSOF LIVER, STOMACH, INTESTINE, RED MUSCLES, WHITE MUSCLES, HEART, BRAIN AND GILLS OF T.TRACHURUS. FOR THE PURIFICATION OF THE MULTIPLE ESTERASE FORMS IN THE LIVER OF T. TRACHURUS 7 STEPS WERE USED. FROM 200G OF LIVER, 1.5 MG OF PURIFIED PROTEIN WAS OBTAINED OF SPECIFIC ACTIVITY 45.7 UNITS/MG. THIS REPRESENTS A 1,400-FOLD PURIFICATION AND A 4% YIELD. THE PURIFIED SAMPLE WAS FOUND TO HAVE MOLECULAR WEIGHT 70.000 BY GEL FILTRATION. THE ISOELECTRIC POINT OF THE MULTIPLE ESTERASE FORMS RANGED FROM 4.5 TO 5.2. THE OPTIMUM PH WAS 9.0 AND IONIC STRENGTH 0.1. MAXIMUM TOTAL ACTIVITY APPEARS AT 30 C. HIGHER ACTIVITY WAS OBSERVED FOR THE PROPANIC A- AND B- NAPHTHYL ESTERS AND THE VALERIC P-NITROPHENYL ESTERS. AT 1MM, HIGHER INHIBITION WAS CAUSED BY AG+ IONS (53.2%). FOR ALL 3 MOLECULAR FORMS THE SAME SEQUENCE WAS IDENTIFIED H2N-ALA-ASP-SER-GLN- ALA-PRO-GLU-VAL-HIS- THR-LYS-LEU-GLY-XXX-XXX-ARG-GLY-XXX-TYR-VAL-.

ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΑΝ ΟΙ ΠΟΛΛΑΠΛΕΣ ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΜΟΡΦΕΣ ΤΩΝ ΕΣΤΕΡΑΣΩΝ ΣΤΑ 3 ΕΙΔΗ ΤΟΥ ΓΕΝΟΥΣ TRACHURUS (T.TRACHURUS, T.PICTURATUS ΚΑΙ T. MEDITERRANEUS). ΠΑΡΑΤΗΡΗΘΗΚΕ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΕΙΔΟΥΣ ΣΤΑ ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΤΙΚΑ ΠΡΟΤΥΠΑ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΩΝ ΛΕΥΚΩΝ ΜΥΩΝ ΤΩΝ 3 ΕΙΔΩΝ. ΕΠΙΣΗΣ ΠΑΡΑΤΗΡΗΘΗΚΕ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΙΣΤΟΥ ΣΤΑ ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΤΙΚΑ ΠΡΟΤΥΠΑ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΩΝ ΤΩΝ ΙΣΤΩΝ ΣΥΚΩΤΙ, ΕΝΤΕΡΟ, ΕΡΥΘΡΟΙ ΜΥΕΣ, ΛΕΥΚΟΙ ΜΥΕΣ, ΚΑΡΔΙΑ, ΕΓΚΕΦΑΛΟΣ ΚΑΙ ΒΡΑΓΧΙΑ ΤΟΥ T.TRACHURUS. ΓΙΑ ΤΟΝ ΚΑΘΑΡΙΣΜΟ ΤΩΝ ΠΟΛΛΑΠΛΩΝ ΕΣΤΕΡΑΣΙΚΩΝ ΜΟΡΦΩΝ ΑΠΟ ΤΟ ΣΥΚΩΤΙ ΤΟΥ T.TRACHURUS ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΘΗΚΑΝ 7 ΣΤΑΔΙΑ. ΑΠΟ 200 GR ΙΣΤΟΥ ΕΛΗΦΘΗΚΑΝ 1,5 MGΚΑΘΑΡΙΣΜΕΝΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΗΣ. Η ΕΙΔΙΚΗ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΣΤΟ ΤΕΛΕΥΤΑΙΟ ΣΤΑΔΙΟ ΚΑΘΑΡΙΣΜΟΥ ΗΤΑΝ 45,7 UNITS/M Ο ΚΑΘΑΡΙΣΜΟΣ 1.400 ΦΟΡΕΣ ΚΑΙ Η ΑΠΟΔΟΣΗ 4%. ΤΟ ΜΟΡΙΑΚΟ ΒΑΡΟΣ ΤΟΥΚΑΘΑΡΙΣΜΕΝΟΥ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ ΒΡΕΘΗΚΕ 70.000 ΜΕ ΜΟΡΙΑΚΗ ΔΙΗΘΗΣΗ HPLC. ΤΟ ΙΣΟΗΛΕΚΤΡΙΚΟΣΗΜΕΙΟ ΤΩΝ ΠΟΛΛΑΠΛΩΝ ΕΣΤΕΡΑΣΙΚΩΝ ΜΟΡΦΩΝ ΗΤΑΝ ΜΕΤΑΞΥ 4,5 ΚΑΙ 5,2. ΤΟ ΑΡΙΣΤΟ ΡΗ ΚΑΙ Η ΙΟΝΤΙΚΗ ΙΣΧΥ ΗΤΑΝ 9,0 ΚΑΙ 0,1 ΑΝΤΙΣΤΟΙΧΑ. ΜΕΓΙΣΤΗ ΣΥΝΟΛΙΚΗ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΠΑΡΑΤΗΡΗΘΗΚΕ ΣΤΟΥΣ 30 C. ΜΕΓΑΛΥΤΕΡΗ ΑΝΑΣΤΟΛΗ ΠΡΟΚΑΛΕΣΑΝ ΤΑ AG+. ΜΕΓΑΛΥΤΕΡΗ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΠΑΡΑΤΗΡΗΘΗΚΕ ΓΙΑ ΤΟΥΣ ΠΡΟΠΑΝΙΚΟΥΣ Α- ΚΑΙ Β- ΝΑΦΘΥΛΕΣΤΕΡΕΣ ΚΑΙ ΤΟ ΒΟΛΕΡΙΚΟ Π- ΝΙΤΡΟΦΑΙΝΥΛΕΣΤΕΡΑ. ΓΙΑ 3 ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΜΟΡΦΕΣ ΒΡΕΘΗΚΕ Η ΙΔΙΑ ΑΛΛΗΛΟΥΧΙΑ: H2N-ALA-ASP-SER-GLN-ALA-PRO- GLU-VAL-HIS-THR-LYS-LEU- GLY-XXX-XXX-ARG-GLY-XXX-TYR-VAL-.