ΣΥΜΒΟΛΗ ΣΤΗ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΔΙΑΜΟΡΦΩΣΗΣ ΤΩΝ ΕΓΚΕΦΑΛΙΝΩΝ-ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ ΠΥΡΗΝΙΚΟΥ ΜΑΓΝΗΤΙΚΟΥ ΣΥΝΤΟΝΙΣΜΟΥ (Ν.M.R.) ΟΞΥΓΟΝΟΥ-17 ΚΑΙ ΑΖΩΤΟΥ-14

Abstract

17O-14N-NMR CHEMICAL SHIFTS AND LINEWIDTHS OF THE CARBOXYL AND AMINO TERMINAL GROUPS OF THE SELECTIVELY ENRICHED IN THE CARBOXYL OXYGENS LEU-U- ENKEPHALIN (17O)LEU-OH, PHE-(17O)LEU-OH, GLY-PHE- (170)LEU-OH AND GLY-GLY-PHE(170 WERE MEASURED IN AQUEOUS SOLUTION THROUGHOUT THE WHOLE PH RANGE. ENRICHMENT IN 17O WAS ACHIEVED BY SAPONIFICATION OF THE CORRESPONDING O-METHYL ESTERS. IONIZATION CONSTANDS AND TITRATION SHIFTS WERE OBTAINED BY NONLINEAR LEAST- SQUARES FITS TO ONE-PROTON TITRATION CURVES, (17O)LEU-OH EXHIBITS A PROFOUND PH DEPENDENT SOLVATIONCHANGES UPON DEPROTONATION OF THE CARBOXYL GROUP AS SHOWN BY 17O AND 14N NMR LINEWIDTHS. IN CONTRAST ALL THE PEPTIDES STUDIED DO NOT EXHIBIT PH DEPENDENT COMFORMATIONAL (SOLVATION) CHANGES UPON DEPROTONATION OF THE CARBOXYL GROUP AND AHEAD-TO-TAIL INTRAMOLECULAR ASSOCIATION BETWEEN THE IONIC TERMINAL GROUPS SHOULDBE EXCLUDED. IT IS SHOWN THAT THE PEPTIDES DO NOT EXHIBIT ISOTROPIC OVERALL MOLECULAR MOTION AND THAT SEGMENTAL MOTION RATHER THAN INTERNAL MOTION AFFECTS THE EFFECTIVE CORRELATION TIMES AT THE SITES OF THE CARBOXYL OXYGENS AND THE AMINO NITROGEN.

ΠΡΟΚΕΙΜΕΝΟΥ ΝΑ ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΟΥΜΕ ΤΟ ΠΡΟΒΛΗΜΑ ΤΗΣ ΔΙΑΜΟΡΦΩΣΗΣ ΤΩΝ ΕΓΚΕΦΑΛΙΝΩΝ ΚΑΙ ΙΔΙΑΙΤΕΡΑ Σ'ΟΤΙ ΑΦΟΡΑ ΤΗΝ ΥΠΑΡΞΗ ΙΟΝΤΙΚΗΣ ΓΕΦΥΡΑΣ ΔΕΣΜΟΥ ΥΔΡΟΓΟΝΟΥ 'Η ΜΑΚΡΑΣ ΑΠΟΣΤΑΣΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΣΤΑΤΙΚΩΝ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΩΝ ΑΝΑΜΕΣΑ ΣΤΙΣ ΤΕΛΙΚΕΣ ΟΜΑΔΕΣ ΣΕ ΥΔΑΤΙΚΟ ΔΙΑΛΥΜΑ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΑΜΕ ΤΑ ΕΞΗΣ ΠΑΡΑΓΩΓΑ: (17Ο)LEU-OH, PHE-(17O)LEU-OH, GLY -PHE-(17O)LEU-OH, GLY-GLY-PHE-(17O)LEU-OH ΚΑΙ TYR-GLY-GLY-PH ΓΙΑ ΤΟΝ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΟ ΣΚΟΠΟ ΜΕΛΕΤΗΣΑΜΕ ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ NMR-17O ΚΑΙ 14Ν, ΤΗΝ ΣΥΜΠΕΡΙΦΟΡΑ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΑ 17Ο ΤΩΝ ΕΚΛΕΚΤΙΚΩΣ ΕΜΠΛΟΥΤΙΣΜΕΝΩΝ ΣΕ 17Ο ΚΑΙ 14Ν, ΤΗΝ ΣΥΜΠΕΡΙΦΟΡΑ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΑ 17Ο ΤΩΝ ΕΚΛΕΚΤΙΚΩΣ ΕΜΠΛΟΥΤΙΣΜΕΝΩΝ ΣΕ 17Ο ΚΑΡΒΟΞΥΛΙΚΩΝ ΟΞΥΓΟΝΩΝ ΚΑΘΩΣ ΚΑΙ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΑ ΤΟΥ 14Ν ΤΩΝ ΤΕΛΙΚΩΝ ΑΜΙΝΟΜΑΔΩΝ ΟΛΩΝ ΤΩΝ ΑΝΑΛΟΓΩΝ ΠΟΥ ΠΡΟΑΝΑΦΕΡΑΜΕ ΣΑΝ ΣΥΝΑΡΤΗΣΗ ΤΟΥ ΡΗ. Ο ΕΜΠΛΟΥΤΙΣΜΟΣ ΣΤΟ ΚΑΡΒΟΞΥΛΟ ΑΚΡΟ ΕΠΙΤΕΥΧΘΗΚΕ ΜΕ ΣΑΠΩΝΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ ΑΝΤΙΣΤΟΙΧΩΝ Ο-ΜΕΘΥΛΕΣΤΕΡΩΝ. ΟΙ ΣΤΑΘΕΡΕΣ ΙΟΝΙΣΜΟΥ ΚΑΙ ΟΙ ΜΕΤΑΤΟΠΙΣΕΙΣ ΤΙΤΛΟΠΟΙΗΣΗΣ ΕΛΗΦΘΗΣΑΝ ΜΕ ΠΡΟΣΑΡΜΟΓΗ ΣΕ ΚΑΜΠΥΛΕΣ ΤΙΤΛΟΠΟΙΗΣΗΣ ΜΕ ΤΗΝ ΜΕΘΟΔΟ ΤΩΝ ΜΗ ΓΡΑΜΜΙΚΩΝ ΑΝΙΣΟΒΑΡΩΝ ΤΕΛΕΙΩΝ ΤΕΤΡΑΓΩΝΩΝ. Η ΕΝΥΔΑΤΩΣΗ ΤΗΣ (17Ο)LEU -OH ΕΞΑΡΤΑΤΑΙ ΠΡΟΦΑΝΩΣ ΑΠΟ ΤΟ ΡΗ ΚΑΙ ΑΛΛΑΖΕΙ ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΑΠΟΠΡΩΤΟΝΙΩΣΗ ΤΗΣ ΚΑΡΒΟΞΥΛΟΜΑΔΑΣ, ΓΕΓΟΝΟΣ ΠΟΥ ΓΙΝΕΤΑΙΦΑΝΕΡΟ ΑΠΟ ΤΑ ΕΥΡΗ ΑΠΟΡΡΟΦΗΣΗΣ ΤΗΣ ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑΣ NMR-17O KAI 14N. ΣΕ ΑΝΤΙΘΕΣΗ, ΟΛΑ ΤΑ ΠΕΠΤΙΔΙΑ ΠΟΥ ΜΕΛΕΤΗΣΑΜΕ ΔΕΝ ΕΜΦΑΝΙΖΟΥΝ ΕΞΑΡΤΩΜΕΝΕΣ ΑΠΟ ΤΟ ΡΗ ΑΛΛΑΓΕΣ ΤΗΣ ΔΙΑΜΟΡΦΩΣΗΣ (ΕΝΥΔΑΤΩΣΗ), ΟΙ ΔΕ ΕΝΔΟΜΟΡΙΑΚΕΣ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΚΕΦΑΛΗΣ-ΑΚΡΟΥ ΑΝΑΜΕΣΑ ΣΤΙΣ ΦΟΡΤΙΣΜΕΝΕΣ ΤΕΛΙΚΕΣ ΟΜΑΔΕΣ ΘΑ ΠΡΕΠΕΙ ΝΑ ΑΠΟΚΛΕΙΣΘΟΥΝ. ΣΥΝΕΠΩΣ ΤΑ ΠΕΠΤΙΔΙΑ ΠΟΥ ΜΕΛΕΤΗΣΑΜΕ ΔΕΝ ΕΜΦΑΝΙΖΟΥΝ ΙΣΟΤΡΟΠΗ ΟΛΙΚΗ ΜΟΡΙΑΚΗ ΚΙΝΗΣΗ. ΚΥΡΙΑ 'Η ΤΜΗΜΑΤΙΚΗ ΚΑΙ ΟΧΙ Η ΕΣΩΤΕΡΙΚΗ ΚΙΝΗΣΗ ΕΠΙΔΡΑ ΣΤΟΥΣ ΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΟΥΣ ΧΡΟΝΟΥΣ ΣΥΣΧΕΤΙΣΗΣΓΙΑ ΤΗΝ ΜΟΡΙΑΚΗ ΠΕΡΙΣΤΡΟΦΗ ΣΕ ΟΤΙ ΑΦΟΡΑ ΤΑ ΚΑΡΒΟΞΥΛΙΚΑ ΟΞΥΓΟΝΑ ΚΑΙ ΤΑ ΑΖΩΤΑ ΤΩΝ ΤΕΛΙΚΩΝ ΑΜΙΝΟΜΑΔΩΝ.